蓝靛果多糖的分离纯化及免疫调节活性研究OA

目的旨在从蓝靛果(L.caerulea)中分离提取出一种新型纯化蓝靛果多糖(THP-2),探究其免疫调节活性。方法采用超声辅助水提醇沉法和凝胶柱层析等技术对L.caerulea进行多糖分离提取与纯化工艺,通过凝胶渗透色谱、离子色谱、高碘酸氧化与smith降解、红外光谱、核磁共振波谱以及刚果红实验等多组学方法,系统表征THP-2的相对分子质量、纯度及化学结构进行表征和分析。体外细胞实验采用DC2.4细胞和Raw264.7细胞模型对THP-2免疫调节活性进行初步评价。结果本研究从L.caerulea中分离纯化出一种新型多糖组分THP-2,其化学组成和结构特征与既往文献报道的蓝靛果多糖(THP)存在显著差异。该多糖的平均相对分子质量为123090,单糖组分包括糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸,摩尔比为27.84∶52.28∶8.47∶6.05∶2.75∶0.90∶0.88∶0.83。糖苷键分析表明,THP-2主要由(1→5)、(1→3)、(1→4)、(1→6)、(1→3,4)、(1→6,4)等糖苷键组成。免疫活性研究表明,THP-2能够显著激活DC2.4细胞的共刺激分子CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ的表达(P<0.05),促进促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌(P<0.05),同时上调Raw264.7细胞的共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达(P<0.05),增强促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达(P<0.05)。此外,THP-2还能促进DC2.4细胞与Raw264.7细胞NO合成相关分子iNOS表达(P<0.05),增加NO分泌量(P<0.05),上调胞内促炎相关蛋白p-p65、p-IκB表达水平(P<0.05),增加DC2.4细胞的p-Akt蛋白含量(P<0.05)。结论本研究成功从L.caerulea中分离纯化出一种新型多糖组分THP-2,并对其化学结构进行了系统鉴定和表征。THP-2主要通过激活NF-κB信号通路和PI3K/Akt通路促进DC2.4细胞成熟分化,并通过NF-κB通路促进Raw264.7细胞向M1型巨噬细胞分化的能力。