枢经推拿对神经病理性疼痛大鼠Piezo1调控NLRP3/caspase-1通路的影响及镇痛机制OA

目的:探讨枢经推拿机械力刺激对神经病理性疼痛大鼠压电性机械敏感通道Piezo1调控机械传导调控NLRP3/caspase-1信号通路的影响,探讨其镇痛机制。方法:将42只雌性SD大鼠随机分为7组,每组6只。枢经推拿组、假推拿组、模型组通过L5脊神经的双层结扎,构建神经病理性疼痛(SNL)模型。构建SNL模型成功后,阴性对照组、Piezo1病毒组当天分别经鞘内注射Piezo1阴性对照病毒试剂、Piezo1低表达病毒试剂。假手术组,仅暴露并分离L5脊神经2~3 min,不予结扎。正常组不予处理。模型组、正常组、假手术组、阴性对照组、Piezo1病毒组,不干预,连续观察14 d。术后1 d,枢经推拿组对相应穴位用手法模拟仪进行推拿刺激,假推拿组则同时轻抚大鼠双侧后肢,连续14 d干预。分别于术前,术后1、3、14 d测定各组大鼠的机械痛阈值(PWMT)、热痛阈值(PWTL);术后14 d,采用免疫印迹检测各组大鼠Piezo1蛋白水平;采用免疫荧光染色法检测各组大鼠脊髓组织中NLRP3和caspase-1的表达情况;采用ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠从术后第1天开始PWTL值、PWMT值降低(P<0.05)。与模型组比较,术后第3、14天枢经推拿组、Piezo1病毒组PWTL值、PWMT值显著上升(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠脊髓背角中Piezo1蛋白、NLRP3、caspase-1、血清中IL-1β表达含量均显著上升(P<0.05)。与模型组比较,枢经推拿组、Piezo1病毒组大鼠脊髓背角中Piezo1蛋白、NLRP3、caspase-1、血清中IL-1β表达含量均显著下降(P<0.05)。结论:枢经推拿手法能减轻神经病理性疼痛,其机制与下调压电性机械敏感通道Piezo1蛋白,抑制NLRP3炎症小体活化,下调caspase-1表达,并减少炎症因子IL-1β释放有关。