梅山猪群中猪肺炎支原体分离、鉴定及药物敏感性分析OA

梅山猪是我国太湖流域地方品种猪的重要代表之一,但猪肺炎支原体(Mhp)的感染一直制约着该猪种的发展。本研究旨在揭示感染梅山猪的猪肺炎支原体菌株的遗传特征、毒力及药物敏感性,为梅山猪支原体肺炎的防控提供依据。首先采集出栏前未用抗生素,病变评分≥15分且Mhp实时荧光定量PCR(qPCR)检测Ct值<30的梅山猪肺脏组织,利用KM2培养基进行Mhp分离,通过菌落形态、qPCR及16S rRNA基因测序对培养物进行鉴定。然后采用多位点序列分型(MLST)分析分离株的基因型。通过结晶紫染色法测定Mhp分离株生物被膜形成能力,并通过扫描电镜观察Mhp分离株感染离体培养梅山猪气管环后纤毛损伤情况以评估其毒力。最后采用微量肉汤稀释法测定10种常用抗菌药物对Mhp分离株的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,从10份肺脏样本中成功分离到3株Mhp,命名为Mhp-MS-2401、Mhp-MS-2402和Mhp-MS-2403。MLST分型显示3株均为ST252型,为国内外首次报道。3株分离株均具有较强的生物被膜形成能力(OD_(570 nm)>4ODc),且能引起离体气管环纤毛严重损伤脱落。药物敏感性试验表明,3株分离株对泰妙菌素高度敏感(MIC≤0.0078μg·mL^(-1)),对泰乐菌素和林可霉素敏感(MIC=0.062μg·mL^(-1)),但对替米考星(MIC=32μg·mL^(-1))、泰万菌素和庆大霉素(MIC=8μg·mL^(-1))耐药。本研究从梅山猪中成功分离并鉴定出ST252型Mhp强毒株,该菌株对泰妙菌素敏感,但对替米考星和泰万菌素耐药,为梅山猪Mhp感染的临床用药和综合防控提供参考。