达原饮通过调节肺泡巨噬细胞TRAIL-DR5通路改善小鼠急性肺损伤的作用研究OA

目的探讨达原饮对小鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的作用及潜在机制。方法将小鼠随机分为模型组、达原饮低、中、高剂量(2.73、5.46、10.92 g/kg)组、地塞米松(2 mg/kg)组和正常组,每组12只。各组小鼠于造模前7 d分别灌胃给予相应药物干预,1次/d。随后对模型组、达原饮各剂量组和地塞米松组小鼠通过气管滴注脂多糖构建ALI模型。大体观察并计算肺指数;HE染色观察肺组织病理学变化;ELISA检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)含量;TUNEL染色观察肺组织细胞凋亡情况;免疫荧光观察M1型巨噬细胞标志物CD86与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)蛋白共定位情况;Western blotting检测肺组织中TRAIL、死亡受体5(Death receptor 5,DR5)、Cleaved Caspase-8和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现肺泡间隔增宽、毛细血管充血等明显的病理损伤,肺指数显著升高(P<0.05);肺泡灌洗液中TNF-α、IFN-γ和IL-6含量显著升高(P<0.05),细胞凋亡数量显著增加(P<0.05);同时,肺组织中CD86与TRAIL蛋白共定位细胞数量显著增加(P<0.05),且TRAIL、DR5、Cleaved Caspase-8和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,达原饮低、中、高剂量组和地塞米松组小鼠肺组织病理损伤明显改善,肺指数显著降低(P<0.05);肺泡灌洗液中TNF-α、IFN-γ和IL-6含量显著降低,细胞凋亡数量显著减少(P<0.05);同时,肺组织中CD86与TRAIL蛋白共定位细胞数量减少,TRAIL、DR5、Cleaved Caspase-8和Cleaved Caspase-3蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论达原饮可减少肺泡上皮细胞凋亡,改善小鼠ALI,其机制可能与调节肺泡巨噬细胞TRAIL-DR5通路有关。