基于Notch1/Twist1信号通路探讨温冲汤调控上皮间质转化治疗子宫内膜异位症的作用机制OA

目的 本研究旨在阐明温冲汤通过调控Notch1/Twist1信号通路介导上皮-间质转化进程治疗子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)的分子作用机制。方法 选取75只6周龄SPF级雌性SD大鼠,随机将其分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组及西药组,通过返折法建立卵巢型EMs大鼠模型。实验中分别测定各组大鼠异位灶体积及质量,并采用苏木精-伊红(HE)染色技术观察子宫及异位灶组织的病理形态学变化。采用免疫组织化学法(IHC)检测子宫及异位灶组织中Notch1、Twist1、上皮钙黏蛋白(Ecadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白定位表达情况;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)定量分析上述指标在子宫及异位灶组织中的表达水平;同时运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测上述基因在相应组织中的mRNA表达水平。结果 与模型组大鼠异位灶相比,各给药组大鼠异位灶的体积和质量均显著减小(P<0.01)。Western blot检测结果表明,相较于假手术组,模型组子宫组织中Notch1、Twist1、Ncadherin、Vimentin、α-SMA、VEGF及MMP-9蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,各给药组子宫及异位灶中Notch1、Twist1、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、VEGF及MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与假手术组相比,模型组子宫组织中Notch1、Twist1、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、VEGF及MMP-9的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),E-cadherin的mRNA表达水平显著下调(P<0.05);与模型组相比,各给药组子宫及异位灶中Notch1、Twist1、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、VEGF及MMP-9的mRNA表达水平显著下调(P<0.05),E-cadherin的mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。结论 温冲汤可显著抑制EMs异位病灶的体积与质量,有效控制病情进展,其作用机制可能与调控Notch1/Twist1信号通路介导的上皮-间质转化过程密切相关。