条件性敲除ASFV A137R基因重组毒株的构建及其互作病毒蛋白鉴定OA
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起的一种重要的猪烈性传染病。为探究ASFV结构蛋白pA137R的生物学功能,本研究利用同源重组技术,成功构建了由大肠杆菌乳糖阻遏蛋白-操纵基因系统参与调节的A137R基因条件性敲除重组毒株ASFV-v A137Ri-3×Flag。PCR鉴定证实获得的条件性敲除重组毒株ASFV-v A137Ri-3×Flag纯净。在不添加IPTG时,其体外复制能力较野生型毒株降低约一个lg值。间接免疫荧光(IFA)试验显示内源性p A137R蛋白在细胞质和细胞核呈点状分布;免疫电镜观察结果显示,金颗粒标记的pA137R定位于病毒粒子的衣壳及核心区域;透射电子显微镜观察进一步发现病毒工厂出现大量的管状结构,病毒组装过程出现异常。利用免疫共沉淀(Co-IP)联合质谱筛选发现pA137R与ASFV pB407L和pNP868R分别互作。本研究进一步阐明了ASFV pA137R蛋白功能和ASFV的组装机制,为ASF疫苗设计及特异性靶向抗病毒药物研发提供了理论依据。
胥艺凡;周艳龙;李佳瑞;胡仕民;任静静;吴俊煌;郑海学;李丹;王衡
华南农业大学兽医学院、广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州510642 中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046 国家非洲猪瘟区域实验室(广州),广东广州510642中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046中国农业科学院、兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046华南农业大学兽医学院、广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广东广州510642 国家非洲猪瘟区域实验室(广州),广东广州510642 华南农业大学、非洲猪瘟防控技术研究中心、国家生猪种业工程技术研究中心,广东广州510642
农业科技
非洲猪瘟病毒A137R基因重组毒株
《中国兽医科学》 2026 (7)
P.871-880,10
国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-35)国家重点研发计划项目(2025YFD1800600)国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/C03)广东省生物安全与防控(动物方向)共性关键技术体系项目(2024CXTD15)甘肃省自然科学基金项目(25JRRA445)甘肃省基础研究创新群体项目(25JRRA434)。
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