跨膜丝氨酸蛋白酶ST14通过促进禽传染性支气管炎病毒S蛋白裂解增强病毒感染OA

旨在阐明跨膜丝氨酸蛋白酶ST14在禽传染性支气管炎病毒(IBV)感染过程中的作用及其与病毒刺突蛋白(S)的分子互作机制。首先通过质谱鉴定筛选出互作蛋白,结合免疫共沉淀验证ST14与IBV S蛋白相互作用。进一步GST pull-down试验表明ST14与S蛋白为直接相互作用。为探究ST14对病毒复制的影响,利用Western-blot和RT-qPCR检测不同剂量ST14在过表达条件下病毒蛋白及m RNA的表达水平,并通过重组ST14蛋白处理病毒粒子后观察病毒感染能力的变化。同时,通过检测S蛋白裂解为S1/S2亚基的情况探究ST14对S蛋白裂解的影响,并构建S1/S2裂解位点缺失突变体以验证其对二者互作的关键作用。Western-blot和RT-qPCR结果表明,ST14以剂量依赖的方式促进病毒复制。经重组ST14蛋白处理后,IBV感染细胞的能力显著降低。进一步研究发现,过表达ST14促进IBV S蛋白裂解为S1/S2亚基,缺失S1/S2裂解位点二者互作减弱。以上结果表明,ST14对IBV复制具有正向调节作用,其可能是促进IBV S蛋白裂解的一个关键宿主因子。