电针“四关”调控海马NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善卒中后抑郁大鼠细胞焦亡与抑郁行为学研究OA

目的探究电针“四关”对卒中后抑郁(PSD)大鼠海马NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路及抑郁行为学的影响。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和药物组,每组10只。除外,其余组均采用改良大脑中动脉栓塞法联合慢性不可预知温和应激制备PSD模型,电针组选取“四关”(双侧“合谷”“太冲”)进行干预,30 min/次,药物组予氟西汀溶液(0.233 g/L)灌胃,均每日1次,连续21 d。分别于造模前后及干预1、7、14、21 d称量大鼠体质量,造模前后和干预21 d进行糖水偏好实验、强迫游泳实验、旷场实验以评定抑郁样行为,干预结束后尼氏染色观察缺血侧海马组织神经元形态,Western blot测定缺血侧海马组织ASC、白细胞介素(IL)-18、消皮素D蛋白N端片段(GSDMD-N)、半胱天冬酶-1(Caspase-1)、Cleaved Caspase-1、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、IL-1β蛋白表达,免疫荧光双标检测缺血侧海马组织小胶质细胞标志物Iba-1与GSDMD-N共表达,实时荧光定量PCR检测ASC、NLRP3 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠体质量明显降低(P<0.01),糖水消耗量、旷场实验水平运动得分和垂直运动得分明显降低(P<0.05,P<0.01),强迫游泳不动时间明显延长(P<0.01),缺血侧海马组织可见大量坏死神经元(P<0.05),尼氏体数量减少,细胞水肿,ASC、IL-18、GSDMD-N、Cleaved Caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白表达明显升高(P<0.05),GSDMD-N/Iba-1共表达明显升高(P<0.01),ASC、NLRP3 mRNA表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,干预14、21 d电针组和药物组大鼠体质量明显升高(P<0.01),糖水消耗量、旷场实验水平运动得分和垂直运动得分明显升高(P<0.05,P<0.01),强迫游泳不动时间明显缩短(P<0.01),海马神经元数目增多(P<0.05),细胞水肿减轻,尼氏体增多,ASC、IL-18、GSDMD-N、Cleaved Caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白表达明显降低(P<0.05),GSDMD-N/Iba-1共表达明显降低(P<0.05),ASC、NLRP3 mRNA表达明显降低(P<0.01)。各组Caspase-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针“四关”改善PSD大鼠抑郁症状可能与抑制海马NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路活化,减少细胞焦亡及神经炎症反应有关。