基于肠黏膜屏障探讨固本增骨方对睾丸切除大鼠骨丢失的影响OA

目的观察固本增骨方对雄激素减退性骨质疏松症(OP)模型大鼠肠黏膜屏障的影响,探讨其改善OP的作用机制。方法将40只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为空白组(8只)、假手术组(8只)和造模组(24只),造模组通过切除双侧睾丸建立OP大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组、睾酮组、固本增骨方组,每组8只,分别予相应干预,连续8周。双能X线骨密度测量仪检测大鼠全身骨密度,HE染色观察结肠组织形态,ELISA测定血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、Ⅰ型前胶原氨基末端前肽(P1NP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、内毒素(ET)、白细胞介素(IL)-6、IL-10含量,Micro-CT扫描右侧股骨骨小梁形态结构,Western blot检测结肠组织紧密连接相关蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1表达,实时荧光定量PCR检测结肠组织Claudin-1、Occludin、ZO-1 mRNA表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠全身骨密度显著降低(P<0.01),肠绒毛结构受损,上皮脱落,黏膜层、黏膜下层及肌层可见不同程度坏死和炎性细胞浸润,血清T、E2、IL-10含量显著降低(P<0.01),P1NP、TRACP-5b、ET、IL-6含量显著升高(P<0.01),骨小梁变细、减少,间隙增宽,网状连接断裂,结构明显破坏,结肠组织Claudin-1、Occludin和ZO-1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,固本增骨方组大鼠全身骨密度显著升高(P<0.01),睾酮组和固本增骨方组大鼠结肠坏死和炎性细胞浸润减轻,肠绒毛及肠腺结构基本完整,血清T、E2、IL-10含量显著升高(P<0.01),P1NP、TRACP-5b、ET、IL-6含量显著降低(P<0.01),骨小梁数目增多、间隙缩小,形态、结构明显改善,结肠组织Claudin-1、Occludin、ZO-1蛋白表达显著升高(P<0.01),睾酮组Occludin、ZO-1mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),固本增骨方组Claudin-1、ZO-1 mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论固本增骨方可能通过改善肠黏膜屏障功能调节相关炎症反应与激素水平,进而平衡骨转换速率,改善OP。