冷休克诱导斑鳜三倍体的条件优化研究OA

[目的]本实验旨在探索冷休克法诱导斑鳜(Sinipercascherzeri)三倍体的最佳诱导条件。[方法]实验分别设置3个诱导时机(TP)(授精后2.5、4.0、5.5min)、3个诱导温度(T)(2、4、6℃)和3个诱导持续时间(D)(10、12、14min),使用正交实验表L(34)获得9个实验组,分别记为P1~P9组,以22℃下正常发育的斑鳜为对照组(P0)。[结果]1)冷休克对斑鳜受精卵孵化率的影响极显著,P0组的孵化率极显著高于其他组(P<0.01)。2)P4组(TP4.0min、T2℃、D12min)诱导率最高,为(83.33±5.77)%;其次为P7组(TP5.5min、T2℃、D14min)和P5组(TP4.0min、T4℃、D14min),分别为(73.33±5.77)%和(70.00±0.00)%,P7组与P4组差异不显著(P>0.05),除外P5和P7组均显著高于其他实验组(P<0.05)。P9组(TP5.5min、T6℃、D12min)斑鳜三倍体诱导率最低,仅有(3.33±5.77)%。3)TP、T和D三者之间交互作用不显著(P>0.05),但两两之间存在着显著的交互作用(P<0.05),三者之间不存在主次关系。4)单因素方差分析结果显示,TP为授精后4.0min时斑鳜三倍体平均诱导率显著高于TP为授精后2.5和5.5min时(P<0.05);T为2、4℃时斑鳜三倍体平均诱导率显著高于T为6℃时(P<0.05);D为12、14min时斑鳜三倍体平均诱导率显著高于D为10min时(P<0.05)。5)6月龄斑鳜三倍体的全长和体质量与二倍体均无显著性差异(P>0.05)。[结论]采用冷休克法可成功诱导出斑鳜三倍体,以诱导率为评价指标,可得冷休克法诱导斑鳜三倍体的适宜条件:诱导时机为授精后4.0min、诱导温度为2或4℃、诱导持续时间为12或14min,以授精后4.0min、2℃、14min为最佳。