基于UPLC-Q-TOF-MS网络药理学及实验验证探讨引火汤治疗肺腺癌的药效物质与作用机制OA

[目的]探索引火汤治疗肺腺癌的药效物质基础及作用机制。[方法]基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术分析引火汤入血成分,结合PubChem等数据库获取成分作用靶点;用GeneCards、OMIM等数据库获取肺腺癌靶点信息;构建引火汤治疗肺腺癌潜在靶点的蛋白质互作(PPI)网络,进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。制备引火汤含药血清干预A549、H1299肺腺癌细胞株,CCK8法确定最佳干预浓度及干预时间,采用大鼠肉瘤(RAS)激活剂ML-098进行挽救实验。划痕实验观察细胞迁移能力;免疫印迹杂交法测定丝裂原活化蛋白激酶病毒癌基因(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路关键分子蛋白表达。[结果]检测出21个引火汤入血成分,获574个药物潜在靶点、1341个肺腺癌治疗潜在靶点和176个交集靶点。KEGG分析显示引火汤通过影响癌症、RAS、MAPK等信号通路发挥抗肺腺癌作用。体外实验表明,引火汤可抑制A549与H1299细胞迁移(P<0.05)。与空白对照组相比,引火汤组MAPK/ERK通路关键蛋白表达降低(P<0.05),引火汤+ML-098组与空白对照组无差异(P>0.05),引火汤抑制作用可被ML-098逆转。[结论]引火汤能有效抑制肺腺癌细胞迁移能力,作用机制可能与MAPK/ERK信号通路相关。