基于TLR4/MyD88/NF-κB通路探赜宣肺清络方对肺炎支原体肺炎痉咳模型大鼠的作用机制OA

[目的]探赜宣肺清络方治疗肺炎支原体肺炎(MPP)痉咳的效果及作用机制。[方法]将60只Wistar大鼠随机分为空白组、支原体肺炎组、支原体肺炎痉咳、中药组、西药组、中西医结合组,每组10只。除空白组外,支原体肺炎组进行支原体肺炎培养液(1×10^(7)CCU/mL)滴鼻建立MPP肺炎模型,其余各组大鼠采用支原体肺炎培养液(1×10^(7)CCU/mL)滴鼻联合烟熏法、辣椒素溶液雾化法建立支原体肺炎感染后痉咳大鼠模型。造模成功后,分别给予中药组14 g/(kg·d)、西药组63 mg/(kg·d)、中西医结合组14 g/(kg·d)+63 mg/(kg·d)以相应剂量浓度药液灌胃给药,连续治疗7 d。空白组、支原体肺炎组、支原体肺炎痉咳组采用0.9%氯化钠溶液灌胃对照。末次给药24 h后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)对大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测IL-6、IL-8、TNF-α以及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平。[结果]与空白组相比,支原体肺炎组、支原体肺炎痉咳组大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α含量明显上升(P<0.05或P<0.001);肺脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平显著上调(P<0.01或P<0.001);肺脏组织TLR4、MyD88、NF-κB、IL-6、TNF-α、IL-8mRNA表达水平显著上调(P<0.01或P<0.001)。经治疗后,与支原体肺炎痉咳组相比,用药组大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低(P<0.01或P<0.001),肺脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.001),TLR4、MyD88、NF-κB-p65、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达水平显著降低(P<0.001)。[结论]宣肺清络方可以通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,抑制MPP引起的氧化应激,降低气道高反应,达到改善肺组织微循环障碍,从而发挥治疗支原体肺炎痉咳的作用。