丹知青娥方通过PCSK9/LDLR通路降脂作用机制研究OA

[目的]基于网络药理学、分子对接和实验探究丹知青娥方(DZQEF)降脂的作用机制。[方法]检测丹知青娥方对HepG2细胞红色荧光标记低密度脂蛋白(Dil-LDL)摄取情况。通过网络药理学方法对丹知青娥方治疗高脂血症作用机制进行预测并结合分子对接进行初步验证。建立高脂血症大鼠模型,检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定丹知青娥方对高脂血症大鼠肝脏前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)和低密度脂蛋白受体(LDLR)和蛋白表达情况。[结果]细胞实验表明,100µg/mL丹知青娥方显著增强HepG2细胞Dil-LDL摄取能力(P<0.01)。筛选出丹知青娥方药物有效活性成分相应靶点:杜仲2543个,丹参4376个,知母1396个,补骨脂3217个。高脂血症相关基因靶点2061个。丹知青娥方与高脂血症共同作用基因靶点324个。基因本体论(GO)分析涉及胆固醇代谢过程,京都基因与基因组百科全书(KEGG)主要与脂质和动脉粥样硬化通路有关,均收录了LDLR基因。分子对接表明PCSK9与核心活性靶点具有良好的对接活性。体内实验表明,10 g/kg丹知青娥方能有效降低高脂血症大鼠的LDL-C、TC、TG、AST、ALT水平以及PCK9蛋白表达,显著上调LDLR蛋白表达(P<0.01)。[结论]丹知青娥方可能通过调节PCSK9/LDLR信号通路发挥降脂作用。