猪源干细胞生长因子和白细胞介素3的表达及多克隆抗体制备OA

为表达猪源干细胞生长因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)蛋白并制备其多克隆抗体,本研究从猪脾脏中扩增SCF基因,合成猪IL-3基因序列,将基因片段分别构建至pET-30a(+)载体,原核表达SCF和IL-3蛋白并进行纯化;将纯化后的SCF和IL-3蛋白分别免疫新西兰兔,制备其多克隆抗体,利用Western blot和IFA对多克隆抗体进行鉴定。结果显示,SCF和IL-3蛋白均可成功在原核表达系统中表达并纯化;制备的多克隆抗体均能够分别与重组SCF和IL-3蛋白发生特异性反应;SCF和IL-3的多克隆抗体IFA效价分别可达1∶1000和1∶500。综上所述,本研究成功表达并纯化了重组SCF和IL-3蛋白,所制备的多克隆抗体可分别与SCF和IL-3蛋白发生特异性反应,并且可识别真核表达的重组蛋白,为SCF和IL-3在细胞免疫中的功能研究奠定了物质基础。