齐墩果酸调节脑源性神经营养因子/酪氨酸激酶受体B/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白信号通路对焦虑症大鼠的改善作用研究OA

目的观察研究齐墩果酸(OA)调节脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路对焦虑症大鼠的改善作用。方法采用不确定性空瓶饮水刺激与慢性束缚相结合的方式建立焦虑症模型大鼠,并分为模型组(Model组)、OA高剂量组、OA中剂量组、OA低剂量组、OA高剂量+TrkB抑制剂(K252a)组,每组12只,另选12只正常大鼠为对照组(Control组)。造模成功后开始给药,OA高、中、低剂量组分别按40、20、10 mg/kg予OA药液灌胃,OA高剂量+K252a组予40 mg/kg OA药液和5μg/kg K252a灌胃,Control组和Model组给予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。通过高架十字迷宫、明暗箱和旷场实验测试评估大鼠焦虑行为,苏木素-伊红(HE)和免疫荧光染色评估海马体组织神经元细胞损伤和BDNF荧光强度,蛋白免疫印迹(Western blot)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)评估BDNF、TrkB、CREB mRNA和蛋白表达。结果与Control组比较,Model组大鼠在开放臂活动次数百分比与停留时间百分比、进入明箱次数与停留时间百分比、进入中央区次数与停留时间、BDNF荧光强度(P<0.05)均降低,脑组织BDNF、TrkB、CREB mRNA及BDNF、TrkB蛋白表达和p-CREB/CREB水平均降低(P<0.05),神经元细胞排列紊乱,肿胀伴膜破裂和核坏死。与Model组比较,OA低、中、高剂量组大鼠在开放臂活动次数百分比与停留时间百分比、进入明箱次数与停留时间百分比、进入中央区次数与停留时间、BDNF荧光强度(P<0.05)均升高,脑组织BDNF、TrkB、CREB mRNA及BDNF、TrkB蛋白表达和p-CREB/CREB水平均升高(P<0.05),神经元细胞形态逐渐恢复正常。与OA高剂量组比较,OA高剂量+K252a组大鼠对上述指标改善均有抑制作用(P<0.05),神经元细胞核变形明显。结论OA可以改善焦虑症大鼠的焦虑症状,其作用机制可能是通过调节BDNF/TrkB/CREB信号通路实现。