坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及其应用研究OA
为了制备高特异性的抗坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)E蛋白结构域Ⅲ(EⅢ)的单克隆抗体,试验采用原核表达系统表达重组TMUV-EⅢ蛋白,免疫Balb/c小鼠后,采用杂交瘤技术筛选单克隆抗体,用单克隆抗体亚类鉴定试剂盒测定其亚类,对单克隆抗体的重链和轻链进行测序并预测其互补决定区(complementary determining region,CDR);采用间接免疫荧光法和免疫组织化学法鉴定其特异性及应用性。结果表明:经筛选后获得1株能稳定分泌抗TMUV单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7A10D9株)。其重链亚类为IgG1,可变区基因属IGHV1家族(核苷酸相似性为93.41%);轻链亚类为Igκ,可变区基因属IGKV8家族(核苷酸相似性为96.55%)。间接免疫荧光证实单克隆抗体7A10D9仅与TMUV发生反应,与鸭瘟病毒(Duck enteritis virus,DEV)、番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)及新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)不发生反应。此外,该单克隆抗体成功应用于表达TMUV-E蛋白的重组DEV活载体疫苗E蛋白表达的检测,免疫组织化学法特异性识别TMUV感染鸭、鹅、小鼠组织中TMUV的分布。说明制备的抗TMUV-EⅢ蛋白单克隆抗体具有高特异性和广适性,可用于TMUV的检测、致病机制研究及疫苗效力评价。
宫鸿轩;李钰钰;吴晓薇;闫奥阳;关飞虎;宋圣尧;张乾义;赵永达;宋亚芬;杨承槐
青岛农业大学动物医学院,山东青岛266109 中国兽医药品监察所,北京100081北京大学实验动物中心,北京100871广州海关技术中心,广州510623中国兽医药品监察所,北京100081 石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003中国兽医药品监察所,北京100081 石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003青岛农业大学动物医学院,山东青岛266109 中国兽医药品监察所,北京100081中国兽医药品监察所,北京100081青岛农业大学动物医学院,山东青岛266109中国兽医药品监察所,北京100081中国兽医药品监察所,北京100081
农业科技
坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ单克隆抗体可变区基因
《黑龙江畜牧兽医》 2026 (7)
P.1-8,8
国家重点研发计划项目(2023YFD18006032022YFD1800602)山东省泰山产业领军人才项目(TS20220701)。
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