玉米籽粒醇溶蛋白与谷蛋白提取方法的优化与比较OA

为确定玉米籽粒中影响蛋白品质的关键组分醇溶蛋白和谷蛋白的最优提取条件,系统比较溶剂类型与浓度对两类蛋白提取效率的影响,以9个不同玉米自交系成熟籽粒样品为材料,分别采用体积分数为55%、70%、80%、90%的异丙醇和正丙醇溶液提取醇溶蛋白,采用Kruskal-Wallis检验分析组间差异,再将提取醇溶蛋白后剩余的残渣分别用由0.5%(W/V)的酒石酸钠、0.24%(W/V)的硫酸铅、1.68%(W/V)的氢氧化钾、5%(V/V)的正丙醇等体积混合而成的混合溶液和0.05 mol/L NaOH溶液提取谷蛋白,并采用配对t检验以及Wilcoxon检验分析组间差异,计算Cohen′s d值。结果表明:对于醇溶蛋白的提取,80%和90%的正丙醇因有机溶剂浓度高,导致蛋白变性而无法用于定量;在6组有效处理中,70%正丙醇、80%异丙醇的提取效果最佳,且二者无显著差异。对于谷蛋白提取,混合溶液的提取量显著高于0.05 mol/L NaOH,且其变异系数更低,表明混合溶液的提取效率更高、重复性更好。综合分析,需快速测定玉米籽粒蛋白组分时,采用70%正丙醇或80%异丙醇提取玉米籽粒醇溶蛋白+用混合溶液提取谷蛋白的组合方式较好。