利拉鲁肽联合神经干细胞减轻大鼠糖尿病视网膜病变的机制研究OA

目的:探究利拉鲁肽(LIR)联合神经干细胞(NSCs)减轻大鼠糖尿病视网膜病变(DR)的作用及可能机制。方法:采用高脂饮食联合一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DR大鼠模型,对照组大鼠喂养正常饲料并腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。建模后,将大鼠分为对照组、DR组、DR+LIR组、DR+BMSCs组、DR+NSCs组、DR+BMSCs+LIR组和DR+NSCs+LIR组,根据分组说明,分别对大鼠腹腔注射200μg/(kg·d)利拉鲁肽和玻璃体腔注射骨髓间充质干细胞(BMSCs)或神经干细胞(NSCs)或联合治疗,共治疗8 wk。检测各组大鼠的空腹血糖(FBG)和血清胰岛素水平,以及视网膜氧化应激指标和血清炎症指标水平。通过苏木精-伊红(HE)染色评价视网膜病变,TUNEL染色检测视网膜细胞凋亡,免疫组织化学检测视网膜组织中SIRT1的表达,免疫荧光检测视网膜组织中BDNF的表达。通过qRT-PCR检测视网膜组织中cZNF532、miR-29a-3p、SIRT1、TGF-β1、NRF2、Keap1和BDNF的转录水平,Western blot检测视网膜组织中SIRT1、TGF-β1、SMAD2/3、p-SMAD2/3、NRF2、Keap1、p65和p-p65的蛋白表达水平。结果:DR+NSCs+LIR组大鼠视网膜形态相较其他组DR大鼠明显改善,FBG、TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平降低(均P<0.05),血清胰岛素水平以及SOD、CAT和GSH-Px水平均升高(均P<0.05),视网膜细胞TUNEL阳性率降低(均P<0.05),视网膜组织中cZNF532、SIRT1、NRF2和BDNF表达水平升高(均P<0.05),miR-29a-3p、TGF-β1、p-SMAD2/3、Keap1和p-p65表达水平均降低(均P<0.05)。结论:利拉鲁肽联合NSCs通过调控cZNF532-miR-29a-3p-SIRT1网络及其下游TGF-β/SMAD、NF-κB和Keap1/NRF2信号通路减轻DR。