UPLC-MS/MS法测定阿普斯特中两种基因毒性警示杂质的残留OA

3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛肟(HS093205)与(S)-3,4-二羟基-5-[(R)-2-(邻苯二甲酰亚胺基)-3-(甲磺酰氨基)丙氧基]苯乙酰胺(HS093317)是阿普斯特合成过程中产生的特征工艺副产物,分子结构含有基因毒性警示片段,其残留量直接影响原料药质量与临床用药安全性。本研究构建一种超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)定量分析方法,同步测定阿普斯特原料药中HS093205与HS093317两种杂质的残留量。以Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱进行分离,采用0.05%甲酸-10 mmol/L甲酸铵溶液与乙腈组成二元流动相体系,设置梯度洗脱,流速0.4 mL/min,结合多反应监测(MRM)模式开展杂质定性与定量分析。方法学验证结果显示,两种目标杂质在7.5990~51.2800 ng/mL浓度区间线性拟合效果佳,线性相关系数r均≥0.9998;检测限为2.3 ng/mL,定量限为7.6 ng/mL;精密度试验中平均加标回收率分别为106.13%、109.57%,RSD<2.0%;准确度试验中平均回收率为106.10%~115.44%,RSD<5.0%。该方法分离效果好,专属性强,灵敏度与准确度高,实际操作高效便捷,可适配阿普斯特原料药中两种基因毒性警示工艺杂质的常规残留检测,为该品种质量标准完善及临床用药安全管控提供了可靠的技术支撑。