天冬多糖协同缺氧诱导因子-1αRNA干扰抑制肝癌血管形成的体内动物实验研究OA

目的探讨天冬多糖(ASP)联合缺氧诱导因子-1αRNA干扰(HIF-1αRNAi)对裸鼠人肝癌细胞皮下移植瘤血管形成的影响。方法将60只5周龄BALB/c雄性裸鼠随机分为对照组、HIF-1αRNAi组、协同组(采用HIF-1αRNAi+ASP干预),每组20只。对照组腋下接种LV-Ctrl-SK-Hep1细胞,其他2组接种LV-shHIF-1α-SK-Hep1细胞。接种12 d后,对照组和HIF-1αRNAi组给予磷酸盐缓冲液(PBS)灌胃,协同组给予ASP灌胃。每组随机抽取10只裸鼠,每3 d测量移植瘤直径,第33天取出移植瘤,测量其体积和质量;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测血管形成相关蛋白表达水平。观察剩余30只裸鼠的生存期,并比较3组的生存率。结果协同组和HIF-1αRNAi组移植瘤体积、质量以及血清VEGF水平均低于对照组,且协同组较HIF-1αRNAi组更低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫组织化学和免疫印迹法检测结果显示,协同组和HIF-1αRNAi组移植瘤的HIF-1α、VEGF、CD34、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶B(p-AKT)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)蛋白表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);协同组以上蛋白表达水平较HIF-1αRNAi组更低,差异有统计学意义(P<0.01)。协同组和HIF-1αRNAi组裸鼠生存率均高于对照组,且协同组生存率高于HIF-1αRNAi组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ASP联合HIF-1αRNAi对裸鼠皮下移植瘤生长具有显著的抑制作用,其机制可能与ASP协同HIF-1αRNAi抑制了肝癌细胞HIF-1α/VEGF通路介导的血管形成相关。