甲基结合蛋白1对人脐静脉内皮细胞迁移、增殖以及血管形成的影响OA

目的探讨甲基结合蛋白1(MBD1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移以及血管形成的影响。方法设置MBD1敲低(sh-MBD1)组和对照(sh-NC)组。使用靶向人MBD1基因shRNA LV3(H1/GFP&Puro)-MBD1-HOMO-270的慢病毒液和携带Scramble shRNA的慢病毒液LV3(H1/GFP&Puro)-NC感染HUVECs细胞,使用嘌呤霉素筛选感染成功的细胞。通过实时定量PCR(RT-qPCR)以及蛋白质印迹检测MBD1基因的沉默效率。通过CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期改变,细胞划痕实验以及Transwell实验检测细胞迁移速度,血管形成实验检测MBD1对HUVECs的血管形成能力的影响,免疫荧光检测MBD1对HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)表达的影响。结果成功构建MBD1敲低的HUVECs;与sh-NC组相比,sh-MBD1组细胞的增殖能力、增殖指数以及迁移能力显著降低(P<0.0001);sh-MBD1组细胞体外生成的血管总长度、血管闭合环路以及血管分支点均低于sh-NC组细胞(P<0.01);sh-MBD1组细胞中VEGFA表达量较对照细胞显著降低(P<0.0001)。结论MBD1促进人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和血管形成,且促进作用可能通过调控VEGFA的表达实现。