熊胆粉通过调控NF-κB和Nrf-2/HO-1信号通路减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤OA

目的探究熊胆粉(BBP)通过调控NF-κB和Nrf-2/HO-1信号通路对脂多糖诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用。方法体外实验:采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外模型,设置对照组、模型组、地塞米松(Dex,25μg/mL)、BBP低剂量组(6.25μg/mL)和BBP高剂量组(12.5μg/mL)。体内实验:将60只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、Dex组(5 mg/kg)、BBP低剂量组(30 mg/kg)和BBP高剂量组(120 mg/kg),12只/组。通过ELISA和相关试剂盒检测细胞和肺组织中炎症与氧化应激指标;通过肺组织病理分析、免疫细胞计数和肺湿/干质量比等指标评价BBP对ALI的干预作用。通过qRT-PCR、Western blotting和免疫组化法分析NF-κB和Nrf-2/HO-1信号通路相关蛋白与基因的表达变化。结果细胞实验结果显示,与模型组相比,BBP组(12.5μg/mL)显著降低TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和活性氧水平,升高SOD水平,且IκB-α、Nrf-2和HO-1的mRNA表达水平升高,而TNF-α、IL-1β、Keap-1和NF-κB(p65)的mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。动物实验结果显示,与对照组相比,模型组小鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁增厚,肺泡内可见大量炎症细胞浸润,肺组织湿/干质量比及支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞数升高(P<0.01);肺组织中的TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6、MDA和NO含量升高,而SOD浓度降低(P<0.01,P<0.001);且肺组织中IκB-α、Nrf-2和HO-1的蛋白表达水平降低,Keap-1和NF-κB(p65)的蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组相比,BBP(120 mg/kg)组能改善小鼠肺组织病理损伤状态,改善肺肿胀程度,降低BALF总细胞数、TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6、MDA和NO水平,升高SOD水平(P<0.05,P<0.01);同时,BBP上调了肺组织中IκB-α、Nrf-2和HO-1的蛋白表达水平,并抑制了Keap-1和NF-κB(p65)的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论BBP可能通过作用于Nrf-2/HO-1和NF-κB信号通路对LPS诱导的ALI发挥保护作用,为后续研究潜在的治疗ALI药物提供依据。