丁香酸甲酯通过抑制MAPK通路调控肠上皮细胞凋亡减轻葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎OA

目的探讨丁香酸甲酯(MS)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠结肠炎的保护作用及机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组(Con组)、造模组(DSS组)、药物处理组(MS组,100 mg/kg),8只/组。通过检测小鼠体质量、疾病活动度(DAI)评分、结肠长度、HE与AB-PAS染色及组织学评分,评估MS对结肠炎的治疗效果。采用ELISA和RT-qPCR检测结肠炎症因子IL-6、TNF-α和IL-10的表达,免疫组化检测髓过氧化物酶(MPO)在结肠组织中的表达,免疫荧光和Western blotting检测紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1的表达与分布,TUNEL染色检测结肠凋亡细胞。体外采用1%DSS诱导NCM460细胞构建凋亡模型,给予MS(50μmol/L)干预后,通过流式细胞术检测细胞凋亡。采用网络药理学预测和Western blotting检测分析MS的作用机制。结果MS处理改善了DSS引起的小鼠体质量下降、结肠缩短、DAI评分和组织学评分升高,减轻肠绒毛结构损伤,增加杯状细胞数量(P<0.05)。同时MS可下调小鼠肠黏膜组织中IL-6、TNF-α和MPO的表达,并上调IL-10的表达(P<0.05)。免疫荧光与Western blotting表明MS可恢复紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1的表达与分布。TUNEL、流式细胞术及Western blotting结果一致表明,MS在体内外均能显著降低肠上皮细胞的凋亡比例,上调抗凋亡蛋白Bcl-2和XIAP,下调促凋亡蛋白C-Caspase3(P<0.05)。KEGG富集分析提示MAPK通路可能与MS疗效相关。Western blotting进一步证实MS能抑制体内外模型中pJNK、p-ERK、p-p38的磷酸化水平(P<0.05)。结论MS通过减少肠上皮细胞凋亡和改善肠屏障损伤来缓解DSS诱导的小鼠结肠炎,其机制可能与抑制MAPK信号通路的表达有关。