基于DRP1/NLRP3通路探究络风宁2号方治疗心力衰竭机制OA

目的探究络风宁2号方(LFN2)对阿霉素(DOX)诱导的H9C2细胞线粒体动力学紊乱与细胞焦亡的干预作用,并基于DRP1/NLRP3信号通路阐明其作用机制。方法将对数生长期H9C2细胞随机分为对照组、模型组、LFN2组、MDIVI-1组及LFN2+MDIVI-1组,通过RT-qPCR、免疫荧光、化学发光、JC-1染色、Western blot等技术,检测细胞损伤、线粒体功能、线粒体动力学及细胞焦亡相关蛋白指标。结果与对照组比较,模型组ANP、BNP显著升高,DRP1、NLRP3 mRNA及蛋白表达显著上调,ROS水平升高,ATP含量与线粒体膜电位显著下降;线粒体分裂蛋白DRP1、DRP1-S616、FIS1及细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达升高,线粒体融合蛋白OPA1、MFN2表达降低。与模型组比较,LFN2组与MDIVI-1组均可有效逆转上述异常指标,改善线粒体动力学失衡、抑制细胞焦亡,二者差异无统计学意义。LFN2与MDIVI-1联用可产生协同效果,可进一步下调DRP1-S616及NLRP3表达。结论LFN2可通过抑制DRP1磷酸化,抑制线粒体过度分裂,阻断NLRP3介导的细胞焦亡通路,减轻心肌细胞损伤,发挥治疗心力衰竭作用。