推拿通过MiR-184/NR2B通路调控神经病理性疼痛大鼠脊髓背角突触可塑性的机制研究OA

目的:探讨推拿通过影响MiR-184/NR2B通路调控神经病理性疼痛大鼠脊髓背角突触可塑性,从而发挥镇痛作用的机制。方法:研究采用随机数字法将40只SD大鼠分为空白组、模型组、推拿组、MiR-184组和MiR-184加推拿组,每组8只。MiR-184组和MiR-184加推拿组鞘内注射MiR-184过表达病毒3周后,除空白组外,其余四组大鼠制备右侧坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型来模拟神经病理性疼痛。造模后第4天起对推拿组和MiR-184组予以推拿干预(5 N,120次/min,10 min/天),推拿干预过程持续14天,其余3组不进行干预。在注射前、注射后第1、7、14、21天及造模后第4、10、14、17天通过行为学(机械缩足阈值和热痛阈值)观察推拿的镇痛作用,空白组、模型组和推拿组虽然不进行鞘内注射,仍进行同样时间节点的行为学检测。干预结束后,切取大鼠脊髓腰膨大,采用透射电镜观察突触结构的改变,使用qRT-PCR方法检测MiR-184和NR2B mRNA的表达水平,使用Western Blot方法检测NR2B的表达水平。结果:行为学结果显示,注射前及注射后1、7、14、21天各组间均没有明显差异。与模型组相比,推拿组与MiR-184组均能显著提升造模后第14、17天的PWT与PWL(P<0.05),而与MiR-184组相比,MiR-184加推拿组的镇痛效果更佳。qRT-PCR检测表明,推拿与MiR-184过表达均可显著上调MiR-184(P<0.001)并下调NR2B的mRNA表达(P<0.05)。Western Blot检测结果表明,模型组大鼠右侧脊髓背角NR2B蛋白表达相比于空白组显著降低,而推拿组和MIR-184组相比于模型组则显著升高(P<0.01)。透射电镜结果提示,推拿与MiR-184过表达能逆转模型组引发的突触数量减少、间隙增宽的突触形态学退行性变及界面曲率的降低的突触界面结构扁平化现象(P<0.05)。结论:推拿可能通过增强MiR-184功能、抑制NR2B通路,调控大鼠脊髓背角突触可塑性,缓解神经病理性疼痛。