FGF21过表达上调SIRT1/GPX4并抑制铁死亡缓解CCl_(4)小鼠急性肝损伤OA

目的观察肝脏靶向成纤维细胞生长因子21(FGF21)过表达对四氯化碳(CCl_(4))诱导急性肝损伤(ALI)的保护效应及其与沉默信息调节因子1/谷胱甘肽过氧化物酶4(SIRT1/GPX4)表达和铁死亡相关指标的关联。方法选取8周龄雌性ICR小鼠随机分为Control组、CCl_(4)组、腺相关病毒(AAV)-FGF21组及AAV-FGF21+CCl_(4)组,通过尾静脉注射带有绿色荧光蛋白(GFP)标记的AAV8-FGF21病毒构建肝脏靶向FGF21过表达模型,腹腔注射CCl_(4)(0.3 mL/kg)诱导ALI,在12 h后进行取材。记录小鼠的体质量和肝质量,计算小鼠体质量和肝质量比值(肝体比);通过生化仪检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;免疫荧光检测FGF21在肝脏组织中的表达;HE染色观察小鼠肝脏的病理变化;RT-qPCR检测铁死亡和铁代谢相关基因(ACSL4、PTGS2、HJV、FPN、GPX4)、FGF21和SIRT1的表达;Western blot检测FGF21、SIRT1和GPX4的蛋白表达水平;试剂盒检测肝匀浆组织中铁含量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与Control组相比,CCl_(4)组FGF21的mRNA和蛋白表达升高(P<0.01),小鼠血清ALT、AST均升高(P<0.01),小鼠肝体比均升高(P<0.01);HE染色结果显示肝细胞膜破裂;ACSL4、PTGS2的mRNA水平、铁含量和MDA水平均增加(P<0.01),SIRT1、GPX4、HJV、FPN mRNA水平、GSH水平和SOD活性均下降(P<0.05),SIRT1和GPX4的蛋白水平均降低(P<0.05)。与CCl_(4)组相比,AAVFGF21+CCl_(4)组血清中ALT、AST均降低(P<0.01),小鼠肝体比下降(P<0.01);HE染色结果显示肝损伤程度减轻;ACSL4、PTGS2 mRNA水平、铁含量和MDA水平均下降(P<0.01),SIRT1、GPX4、HJV、FPN mRNA水平、GSH水平和SOD活性均上升(P<0.05);SIRT1和GPX4蛋白水平均上升(P<0.05)。结论FGF21过表达与SIRT1/GPX4表达上调及铁死亡特征抑制有关,从而改善CCl_(4)诱导的ALI。