石斛碱对脂多糖诱导的BV2小胶质细胞极化的影响及作用机制OA

目的探讨石斛碱(dendrobine,DDB)对脂多糖(LPS)诱导BV2小胶质细胞炎症反应的作用机制。方法将培养的BV2小胶质细胞分为正常对照组(control组)、LPS模型(1 mg·L^(-1))组、DDB低、中、高剂量(50、100、200μmol·L^(-1))组。采用CCK-8检测细胞活力,明场观察细胞形态,Griess法测定NO含量,免疫荧光法检测ROS水平,qPCR检测炎症因子和抗炎因子的表达,ELISA法检测细胞上清液中的促炎因子(TNF-α、IL-6、IL^(-1)β)及抗炎因子(IL^(-1)0、Arg-1)的水平,Western blot检测M1/M2标志蛋白。结果DDB在12.5~400μmol·L^(-1)浓度范围内对BV2细胞无明显毒性,并能明显减轻LPS诱导的BV2细胞形态改变。同时DDB可以明显抑制LPS诱导的NO释放,并有效降低氧化应激水平。ELISA、qPCR、Western blot及免疫荧光结果显示,DDB可以下调TNF-α、IL-6、IL^(-1)β和iNOS的表达,上调IL^(-1)0和Arg-1的表达,并明显抑制M1型标志蛋白CD16/32和iNOS的表达,增强M2型标志蛋白CD206和Arg-1的表达,降低激活标志物Iba-1水平。此外,DDB还抑制LPS诱导的Notch1、Hes1、Hes5蛋白表达,提示其抗炎作用可能通过负向调控Notch信号通路实现。结论DDB能够通过调节小胶质细胞的极化状态,抑制炎症因子释放,并干预Notch通路的激活,具有潜在的神经保护和神经炎症性疾病干预作用。