芪苓益肾方经沉默信息调节因子信号通路改善糖尿病肾病自噬的研究OACHSSCD

目的:探讨芪苓益肾方(QLYSF)是否通过沉默信息调节因子2相关酶1-叉头盒转录因子3a-BCL2/腺病毒E1B 19 kDa相互作用蛋白3(SIRT1-FOXO3a-BNIP3)信号通路增强肾细胞线粒体自噬,改善2型糖尿病肾病(DN)大鼠的肾功能。方法:将36只大鼠按照分层随机法分为对照组和模型组,模型组以高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)(35 mg/kg)腹腔注射建立2型DN模型。造模成功后,将DN大鼠分为模型组、QLYSF低剂量及高剂量组、阳性组,连续干预8周。测空腹血糖、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(Glutamic-oxaloacetic Transaminase,GOT)、肌酐(CREA)、尿素,进行肾脏病理苏木精-伊红(HE)染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)、Masson染色。采用蛋白质印迹法(WB)、实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测沉默信息调节因子1(SIRT1)、叉头盒转录因子3a(FOXO3a)、BCL2/腺病毒E1B-19 kDa相互作用蛋白3(BNIP3)蛋白及基因表达,透射电镜观察线粒体自噬小体,免疫荧光共染BNIP3与微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3),并检测凋亡相关蛋白表达。结果:与模型组比较,QLYSF低剂量组从第6周起血糖显著降低(P<0.01),而高剂量组第4周起效果显现(P<0.05),且在第6~8周效果更优(P<0.001);SIRT1和BNIP3表达升高(P<0.05),FOXO3a表达降低(P<0.05),线粒体损伤减轻(P<0.05),自噬活性提高(P<0.05),Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、C-caspase-3的水平降低(P<0.01)。结论:QLYSF通过激活SIRT1-FOXO3a-BNIP3通路促进线粒体自噬、抑制凋亡,保护DN肾功能,为其治疗提供新靶点。