血管紧张素Ⅱ诱导SH-SY5Y细胞衰老的作用及其机制OA

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导SH-SY5Y细胞衰老的作用及其机制。方法首先采用衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测0、5、10、50μmol/L浓度的AngⅡ(A1~D1组)处理24h对于SHSY5Y细胞衰老的影响,以及使用10μmol/L浓度AngⅡ处理SH-SY5Y细胞24、48、72h(B2~D2组,A2组不添加AngⅡ)对SH-SY5Y细胞衰老的影响。采用Western blotting实验检测SH-SY5Y细胞经0、10μmol/L的AngⅡ(a、b组)处理48h后细胞中p16和p21蛋白的表达水平。采用CCK-8实验检测0、5、10、50μmol/L浓度的AngⅡ(A3~D3组)处理48h对SH-SY5Y细胞活力的影响,以及10μmol/L浓度AngⅡ处理SH-SY5Y细胞24、48、72h(B4~D4组,A4组不添加AngⅡ)对SH-SY5Y细胞活力的影响。结果SA-β-gal染色法检测结果显示,在A1~C1组细胞中,C1组细胞内SA-β-gal染色阳性细胞率最高(F=7.021,t=2.880、3.087,P<0.05)。在A2~C2组细胞中,C2组SA-β-gal染色阳性细胞率最高(F=26.080,t=4.023、6.658,P<0.05),衰老现象均最为显著。Western blotting实验结果显示,与a组相比,b组SH-SY5Y细胞中的p16和p21蛋白相对表达水平均显著升高(t=6.622,18.340,P<0.05)。CCK-8实验检测结果显示,A3~D3组和A4~D4组SH-SY5Y细胞各组间细胞活力比较差异均无显著性(P>0.05)。结论AngⅡ处理可显著诱导SH-SY5Y细胞发生衰老,但未发生细胞损伤,此可能与细胞上AngⅡ特异性受体的功能表达有关。