GSTM3对鼻咽癌细胞增殖、迁移及上皮-间质转化的调控作用OA

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶M3(glutathione S-transferase Mu 3,GSTM3)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞增殖、迁移及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用。方法利用TCGA、CPTAC数据库分析GSTM3在头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达模式及预后意义;利用GEO数据库中的NPC数据集GSE53819分析GSTM3的表达差异,并通过共表达基因的GO富集分析其潜在功能;采用GSE102349中Ⅲ期局部晚期患者队列评估其预后意义。通过RT-qPCR、Western blot检测GSTM3在正常上皮细胞及HNSCC、NPC细胞系中的表达;在NPC细胞C666-1和5-8F中分别构建GSTM3过表达与敲低模型。通过CCK-8法、EdU染色法、流式细胞术检测细胞增殖活性与细胞周期分布;采用Transwell实验及划痕实验评估细胞迁移与侵袭能力;利用荧光探针和ELISA检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)分泌量;通过Western blot检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的蛋白表达。结果生物信息学分析表明,GSTM3低表达与HNSCC不良预后相关(P<0.05)。在GSE53819数据集中,GSTM3在NPC组织中表达显著下调(adj.P<0.05)。共表达基因的GO富集分析显示,与GSTM3相关的基因显著富集于肌肉收缩、糖异生等生物学过程,细胞外基质等细胞组分,以及谷胱甘肽转移酶活性、肌动蛋白结合等分子功能(均P<0.05)。利用GSE102349数据集对Ⅲ期NPC患者的预后进行分析,结果显示GSTM3低表达与高表达患者的总生存期差异无统计学意义(P=0.14)。细胞实验显示,GSTM3在NPC细胞中表达下调;过表达GSTM3诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,可抑制细胞增殖、迁移与侵袭能力,下调N-cadherin蛋白表达并上调E-cadherin蛋白表达(均P<0.05),同时伴随细胞内ROS生成及IL-1β分泌水平降低;敲低GSTM3则产生相反效应(均P<0.05)。结论GSTM3在NPC中表达下调,过表达GSTM3可抑制NPC细胞增殖、迁移及EMT进程。