胆固醇协同HBX-TP73基因对肝细胞和肝癌细胞恶性表型的影响OA

目的探讨胆固醇协同乙型肝炎病毒X基因(hepatitis B virus X gene,HBX)整合插入肿瘤蛋白p73(tumor protein p73,TP73)(HBX-TP73)基因对肝细胞和肝癌细胞恶性表型的影响。方法以THLE-2、Huh7和HepG2为细胞模型,利用CRISPR基因编辑Knock-In技术构建HBX-TP73的细胞模型,包括对照组(Control组)、HBX野生组(HBX-wt组)和突变组(HBX-mt组),通过在细胞培养基中添加胆固醇的方式在体外模拟胆固醇环境,采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验、流式细胞术分别检测胆固醇联合HBX-TP73基因对细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期进程和凋亡的影响。结果CCK-8实验结果显示,胆固醇协同HBX-TP73基因显著增强了THLE-2和Huh7细胞的增殖能力,并在HepG2细胞中逆转了HBX-TP73基因的增殖抑制。细胞划痕与Transwell实验结果显示,胆固醇协同HBX-TP73基因显著增强了THLE-2、Huh7和HepG2细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.01)。流式细胞周期分析显示,胆固醇协同TP73-HBX影响THLE-2细胞周期向S期与G2/M期进展,在HBX-mt组中尤为突出。凋亡实验进一步表明,胆固醇协同HBX-TP73基因显著抑制了THLE-2、Huh7和HepG2细胞的凋亡。结论胆固醇与HBX-TP73基因具有协同作用,能够促进肝细胞及肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与影响细胞周期进程及抑制细胞凋亡有关,最终导致肝细胞和肝癌细胞的异常表型。