巨噬细胞加帽蛋白对缺氧诱导的巨噬细胞活化与极化的影响OA

目的探讨巨噬细胞加帽蛋白(CapG)在缺氧条件下对巨噬细胞活化和极化的影响。方法采用佛波酯诱导人急性单核细胞白血病细胞THP-1分化为巨噬细胞,将其分为常氧组和缺氧组,缺氧组巨噬细胞置于3%O_(2)、92%N_(2)和5%CO_(2)的培养体系中培养0~48 h,CCK-8法检测细胞活力,Transwell小室法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞M1型极化标志物分化簇80(CD80)、CD86、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型极化标志物CD163、CD206、精氨酸酶1(Arg-1)的表达,ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-10及转化生长因子β(TGF-β)浓度,Western印迹法检测细胞CapG蛋白表达水平。细胞通过转染小干扰RNA敲降CapG蛋白或转染慢病毒过表达CapG蛋白,经Western印迹法验证后,将细胞置于常氧和缺氧条件下培养,并检测上述功能及标志物的变化。结果与常氧组相比,缺氧组巨噬细胞活力与迁移能力显著增强,CapG蛋白表达显著上调,M1型极化标志物CD80、CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β表达显著升高,M2型极化标志物CD206、CD163表达显著升高,Arg-1表达在6 h显著升高,在12 h显著降低,IL-10表达显著降低。敲降CapG蛋白可显著抑制常氧和缺氧条件下巨噬细胞活力,显著抑制缺氧诱导的细胞迁移,并显著提高M1型极化标志物CD80、CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β表达,显著降低M2型极化标志物CD206、CD163、Arg-1和IL-10表达。过表达CapG蛋白可显著促进常氧和缺氧条件下巨噬细胞活力及缺氧条件下巨噬细胞的迁移能力,显著降低M1型极化标志物CD80、CD86、iNOS、TNF-α和IL-1β表达,显著提高M2型极化标志物CD206、CD163、Arg-1和IL-10表达。结论CapG增强巨噬细胞活力和迁移能力,抑制M1型极化,促进M2型极化,参与缺氧环境下巨噬细胞功能的调节。