川陕哲罗鲑鳃组织的显微与超微结构观察OA

【目的】观察分析川陕哲罗鲑鳃组织的显微与超微结构,丰富其基础生物学资料,为揭示鱼类鳃组织结构特征与其生活习性的关联提供参考依据。【方法】以人工繁育的川陕哲罗鲑F1代为研究对象,采集鳃组织样品分别用4%多聚甲醛和3%戊二醛保存固定,经石蜡包埋切片后依次进行苏木素—伊红(HE)染色、阿利辛蓝—过碘酸雪夫(AB-PAS)染色、Masson染色及天狼星红染色,光学显微镜下观察鳃组织学形态、黏液细胞类型、胶原纤维分布与分型;同时利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察鳃组织的超微结构。【结果】川陕哲罗鲑有4对鳃,鳃耙呈乳白色针形,排列稀疏(12~14根);鳃丝呈鲜红色,长条状,由基部向前端延伸的过程中逐渐变细小,其末端呈游离状态。鳃弓主要由软骨组织构成,被覆复层上皮细胞;鳃丝表面分布有黏液细胞和泌氯细胞,中央有软骨细胞支撑;鳃小片由呼吸上皮及柱状上皮组成,相邻2个柱细胞的胞体延长即围成毛细血管腔,腔内可见红细胞。AB-PAS染色结果显示,鳃组织中的黏液细胞以分泌中性黏多糖为主(呈PAS阳性),伴有少量酸性黏多糖(呈AB阳性)。Masson染色发现,鳃组织胶原纤维分布均匀,胶原纤维组织面积占比为0.21%~0.31%(平均为0.27%),未见纤维化等典型病变。天狼星红染色结果显示,Ⅰ型胶原纤维的占比为80.00%~90.49%,Ⅲ型胶原纤维的占比为9.51%~19.20%,Ⅰ型胶原纤维/Ⅲ型胶原纤维的比例为4.21~9.51。扫描电子显微镜观察发现,鳃耙表面凹凸不平且有孔洞,鳃弓及鳃丝上皮细胞具有密集的环形微嵴,呈指纹状;鳃丝表面与鳃小片均有黏液,但鳃丝表面的孔洞数量多于鳃小片。透射电子显微镜观察发现,鳃小片主要由扁平上皮细胞、柱细胞、泌氯细胞、巨噬细胞、红细胞、内皮细胞及血管腔中的中性粒细胞等组成,其中,泌氯细胞的细胞核呈长椭圆形,核直径长边约8.3μm、短边约5.6μm,细胞质富含线粒体和粗面内质网。【结论】川陕哲罗鲑的鳃组织结构与其肉食性及高海拔、低水温、急流淡水生境高度适应;且川陕哲罗鲑鳃组织含有巨噬细胞及中性粒细胞等免疫细胞,构成其特有的黏膜免疫屏障,在先天免疫系统中发挥重要作用。