CITED2改善低氧/复氧诱导的人脐静脉内皮细胞线粒体功能OA

目的探究富含谷氨酸/天冬氨酸羧基末端结构域的CBP/p300相互作用反式激活因子2(CITED2)在冠状动脉慢血流(CSF)患者中的表达及其对内皮细胞低氧/复氧(H/R)损伤的调控机制。方法收集CSF患者及健康对照人群外周血样本,用ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和活性氧(ROS)水平,RT-qPCR和Western blot分析外周血单个核细胞(PBMCs)中CITED2、HIF-1α、DRP1、SIRT1和MFN2的表达。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),构建H/R模型,并通过转染siRNA与过表达质粒调控CITED2表达。实验分为对照(control)组、H/R组、H/R+OE-NC组、H/R+OE-CITED2组、H/R+siNC组和H/R+siCITED2组。用二氢乙锭(DHE)和JC-1染色检测细胞内ROS水平及线粒体膜电位变化,RT-qPCR和Western blot检测相关基因及蛋白表达。结果与对照组相比,CSF患者血清中TNF-α、IL-6和ROS水平显著升高,PBMCs中HIF-1α和DRP1表达上调,CITED2、SIRT1和MFN2表达下调(P<0.05)。在HUVECs中,H/R处理后HIF-1α、DRP1表达显著升高,CITED2、SIRT1和MFN2表达降低;过表达CITED2可显著抑制HIF-1α、DRP1表达,上调SIRT1和MFN2,减少ROS生成并恢复线粒体膜电位;敲降CITED2则加剧上述损伤效应。结论CITED2可通过调控HIF-1α、DRP1、SIRT1和MFN2的表达,减少ROS生成、恢复线粒体膜电位,从而改善CSF相关的内皮细胞损伤。