基于整合药理学探讨芩连姜夏汤改善糖脂代谢紊乱的机制OA

目的探究芩连姜夏汤治疗糖脂代谢紊乱的药效物质基础与作用机制。方法借助中医药百科全书(ETCM)、基因名片数据库(GeneCards)等数据库预测芩连姜夏汤治疗2型糖尿病(T2DM)合并血脂异常的药物分子与治疗靶点,对治疗靶点进行蛋白质互作网络分析(PPI)、基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析后筛选出关键成分与核心靶点,通过分子对接进行验证。随后采用SD大鼠制备含药血清1μmol·L-1地塞米松(DEX)诱导构建胰岛素抵抗(IR)-3T3-L1脂肪细胞模型。采用4种血清干预后,检测细胞葡萄糖消耗量及脂代谢水平,筛选含药血清最佳作用浓度。进一步采用质粒转染技术构建脂肪酸结合蛋白4(FABP4)过表达的IR-3T3-L1模型,应用蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测FABP4与过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARG)蛋白与mRNA表达,评估芩连姜夏汤对FABP4/PPARG信号通路的调控效应。结果网络药理学结果显示,芩连姜夏汤治疗T2DM合并血脂异常的关键成分是黄芩素、金合欢素和α亚麻酸,核心靶点是FABP1、FABP4和PPARG;分子对接显示关键成分与核心靶点均具有良好对接活性。芩连姜夏汤含药血清可显著改善IR-3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取功能,胰岛素(INS)刺激下的葡萄糖消耗量显著提高(P<0.01),细胞内总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)含量显著降低(P<0.01),中剂量含药血清的效果最佳。FABP4的过表达会显著降低IR-3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取能力,细胞内TC、TG和FFA的蓄积明显增加(P<0.05)。而中剂量含药血清能显著改善FABP4过表达后的IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取能力,TC、TG和FFA的蓄积显著减少(P<0.01),并降低细胞内FABP4的蛋白质与mRNA表达水平,同时PPARG的蛋白质与mRNA表达水平明显提高(P<0.05)。结论芩连姜夏汤能基于多成分改善IR-3T3-L1脂肪细胞中的糖脂代谢紊乱,其机制可能与FABP4/PPARG信号通路有关。