银环蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶的分离纯化及功能分析OA

为了探究银环蛇(Bungarus multicinctus)蛇毒中L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)的生物活性与抑菌作用机制,通过Superdex G75分子筛、阳离子交换柱从银环蛇粗毒中分离纯化出Bm-LAAO,考察其底物专一性、抑菌活性及相关抑菌作用机制。结果显示:Bm-LAAO的单体分子质量为59.116 kDa;其对L-氨基酸具有较高的专一性,最佳底物为L-Leu、L-Met、L-Glu、L-Arg、L-Ala、L-Lys,其次为L-Ile和L-Trp;3种源自不同产地的银环蛇粗毒中的Bm-LAAO的酶活性相似,没有显著差异;同时,Bm-LAAO具有一定的稳定性,在-20℃保存更为合适。此外,Bm-LAAO还具有抑制革兰氏阴性菌(如大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)生长的抗菌活性,但是对真菌(如白色念珠菌)的抑制效果较差;而过氧化氢酶可以显著减弱Bm-LAAO对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用。本文探究了Bm-LAAO的底物专一性,以及其对多种革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌的抑制作用与相关机制,为Bm-LAAO抑菌作用机理的揭示及应用提供了理论基础。