青藤碱对膝骨关节炎大鼠软骨退变和滑膜巨噬细胞极化的影响及机制研究OA

探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨退变和滑膜巨噬细胞极化的影响及其潜在作用机制。实验选取50只SD大鼠,将其随机分为5组,每组10只:空白组(control,Ctrl)、KOA组、SIN低剂量组(low-dose SIN,SIN-L)、SIN高剂量组(high-dose SIN,SIN-H)和SIN高剂量+香豆霉素A1组(SIN-H+coumermycin A1,SIN-H+CA1)。采用膝关节腔注射碘乙酸钠的方式构建KOA模型,之后开展一系列检测。通过组织学染色观察大鼠滑膜和软骨的病理改变情况;运用ELISA技术检测外周血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-4和IL-10的含量水平;借助免疫荧光染色测定滑膜巨噬细胞极化标志物的水平状况;利用蛋白免疫印迹检测酪氨酸蛋白激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。实验结果显示,相较于Ctrl组,KOA组大鼠软骨Mankin′s和OARSI评分、IL-6和TNF-α水平、CD86/F4/80荧光强度比值、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达水平均显著升高(P<0.05);而软骨和滑膜厚度、IL-4和IL-10水平、CD206/F4/80荧光强度比值则显著降低(P<0.05)。与KOA组相比,SIN-L组和SIN-H组大鼠软骨Mankin′s和OARSI评分、IL-6和TNF-α水平、CD86/F4/80荧光强度比值、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达水平显著降低(P<0.05);软骨和滑膜厚度、IL-4和IL-10水平、CD206/F4/80荧光强度比值显著升高,且呈现出剂量依赖性(P<0.05)。与SIN-H组相比,SIN-H+CA1组大鼠软骨Mankin′s和OARSI评分、IL-6和TNF-α水平、CD86/F4/80荧光强度比值、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达水平显著升高(P<0.05);软骨和滑膜厚度、IL-4和IL-10水平、CD206/F4/80荧光强度比值显著降低(P<0.05)。由此可见,SIN能够显著减轻KOA大鼠膝关节软骨退变情况,促进滑膜巨噬细胞向M2型极化,其发挥作用的机制可能与抑制JAK2/STAT3通路活化有关。