基于网络药理学和实验验证探讨黄芪甲苷治疗糖尿病肾病的作用机制OA

基于网络药理学和实验验证探讨黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的干预作用及机制。采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素诱导建立DN小鼠模型,给予不同剂量AS-Ⅳ连续干预12周;通过检测空腹血糖、肾功能相关指标,评估肾组织病理学,并测定氧化应激与炎症反应相关指标,评估AS-Ⅳ的肾保护作用;网络药理学筛选整合AS-Ⅳ和DN的共同靶点,并进行GO和KEGG富集分析,筛选关键信号通路。通过Auto Dock Vina软件对关键靶点进行分子对接,并通过Western blot进行验证。结果显示,AS-Ⅳ可显著降低DN小鼠空腹血糖、改善肾功能并减轻肾组织病理损伤;降低肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)活性,并抑制肾组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)表达。网络药理学提示,AS-Ⅳ主要作用于AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT serine/threonine kinase 1,AKT1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin,m TOR)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、半胱天冬酶-3(cysteine-aspartic acid protease 3,Caspase-3)等关键靶点,显著富集于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/m TOR(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mechanistic target of rapamycin,PI3K/AKT/m TOR)信号通路。分子对接显示,AS-Ⅳ与PI3K、AKT和m TOR具有良好的结合能力;Western blot结果进一步证实,AS-Ⅳ显著抑制DN小鼠肾组织中PI3K、p-AKT及p-mTOR蛋白表达水平。综上所述,AS-Ⅳ可能通过阻断PI3K/AKT/m TOR信号通路的异常激活,减轻氧化应激与炎症反应、改善肾功能并延缓肾纤维化进程,发挥肾脏保护作用。