基于AMPK/mTOR通路研究补肾活血方对薄型子宫内膜模型大鼠的干预机制OA

目的:基于AMPK/mTOR通路探讨补肾活血方对薄型子宫内膜大鼠的作用机制。方法:采用羟基脲片加10%高分子右旋糖酐构建肾虚血瘀型模型,给予0.2 mL 95%乙醇充盈子宫4~5 min构建薄型子宫内膜大鼠模型。随机将大鼠分为空白组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、补佳乐组。干预3个动情周期后取材,收集各组大鼠子宫内膜组织,应用苏木素-伊红染色(HE)后在光学显微镜下观察子宫内膜组织结构;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测子宫内膜组织中AMPK、mTOR、LC3B、HOXA10、VEGF蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测AMPK、mTOR、LC3B mRNA表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠子宫AMPK、LC3B、HOXA10、VEGF蛋白量显著降低,mTOR蛋白量显著升高,AMPK、LC3B mRNA表达水平显著降低,mTOR mRNA表达水平显著升高(P<0.01),提示薄型子宫内膜模型大鼠存在细胞自噬缺陷,子宫内膜容受性低下。与模型组比较,各个治疗组大鼠子宫AMPK、LC3B、HOXA10、VEGF蛋白量显著升高,mTOR蛋白量显著降低,AMPK、LC3B mRNA表达水平显著升高,mTOR mRNA表达水平显著降低(P<0.01),且高剂量组疗效最佳。结论:补肾活血方能通过调控AMPK/mTOR细胞自噬通路,促进薄型子宫内膜大鼠内膜组织内细胞自噬,改善子宫内膜的结构及增加内膜厚度,提高子宫内膜容受性。