人羊膜间充质干细胞气管内与尾静脉给药改善肺纤维化模型鼠上皮间质转化与凋亡的效果比较OA

目的比较气管内与尾静脉给药人羊膜间充质基质细胞(hAMSCs)对肺纤维化小鼠模型上皮间质转化(EMT)及凋亡的影响。方法体外分离培养原代hAMSCs,流式细胞术鉴定表面标志物如CD44、CD90、CD105等表达。采用气管内注射博来霉素(BLM)构建肺纤维化小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、模型组(BLM)、BLM+气管内给药hAMSCs组、BLM+尾静脉给药hAMSCs组、BLM+尼达尼布组及单纯hAMSCs组。造模21 d时,通过HE染色观察肺泡结构,免疫荧光及免疫印迹(WB)检测E-cadherin和Vimentin表达,TUNEL染色检测肺组织中细胞凋亡情况,小动物活体成像追踪Dir标记的hAMSCs在体内的存留时间。结果流式细胞术证实所培养细胞高表达CD44、CD73、CD90及CD105,低表达CD11b、CD34、CD45、CD19。与模型组相比,尾静脉给药组与气管内给药组的E-cadherin表达均上调(P<0.05),Vimentin表达及TUNEL阳性细胞率均下调(P<0.05)。与尾静脉给药组相比,气管内给药组的TUNEL阳性细胞虽呈下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);两组间E-cadherin及Vimentin表达亦无显著差异(P>0.05)。活体成像显示:气管内给药后,标记的hAMSCs在肺内至少可存留7、14 d时信号基本消失;尾静脉给药后细胞存留约5、7 d时信号消失。结论尾静脉与气管内给药hAMSCs均可显著改善肺纤维化模型小鼠的EMT及细胞凋亡,两种给药途径总体疗效相当。提示除常规的尾静脉给药外,气管内给药可作为一种具有潜力的给药途径。