禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白表达条件优化应用研究OA

旨在提高重组杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)的表达外源蛋白的能力,通过选取细胞密度、接毒量和收获时间3个主要影响表达的因素,采用三因素三水平(3^(3))正交试验设计,分别设置细胞密度(1×10^(6)、2.5×10^(6)、5×10^(6)个/mL)、接毒量(1、5、10 MOI)及收获时间(3、5、7 d)进行系统性优化。结果表明,当细胞密度为5×10^(6)个/mL、接毒量10 MOI、收获时间5 d时,外源蛋白表达量达到峰值。研究结果为高效表达禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白、亚单位疫苗研制和ORF2蛋白单克隆抗体制备提供前期基础,对提升其他重组蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达量具有一定的借鉴意义。