芦丁纳米脂质体的制备及其抗氧化作用研究OA

旨在优化芦丁纳米脂质体(Rutin-nLip)的制备工艺,探究Rutin-nLip体外抗氧化能力及其对伪狂犬病病毒(PRV)感染诱导小鼠氧化损伤的保护作用,为芦丁的开发利用提供理论依据。从逆向蒸发法、改良薄膜分散法和乙醇注入法中优选改良薄膜分散法制备Rutin-nLip;采用单因素试验考察磷脂与胆固醇的质量比、药物与磷脂的质量比、表面活性剂浓度、超声时间、制备温度、水化体积和PBS pH因素对Rutin-nLip包封率的影响,再通过Box-Benhnken响应面法进一步优化,并对Rutin-nLip进行表征;采用2,2-二苯基-1-苦基肼自由基(DPPH·)和2,2′-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基阳离子(ABTS+·)清除试验评价Rutin-nLip体外抗氧化活性;将小鼠随机分为5组,除对照组,其余组小鼠单次肌肉注射10~5 TCID50 PRV(100μL/只),感染后连续给药7 d,通过HE染色切片观察组织病理学变化和检测组织中氧化应激指标GSH-Px、SOD和MDA含量,评价Rutin-nLip对PRV感染诱导小鼠氧化损伤的体内保护作用。结果显示,磷胆比、药脂比和制备温度对Rutin-nLip包封率影响较大,利用改良薄膜分散法,工艺为磷脂与胆固醇的质量比为4.6∶1,芦丁与磷脂的质量比为1∶46,制备温度为42.7℃时制备的Rutin-nLip的芦丁包封率为70.807%±0.699%,平均粒径为(163.5±0.755) nm, PDI为0.473±0.008,Zeta电位为(-1.70±0.293) mV,脂质体呈球形;质量浓度为100μg/mL的Rutin-nLip在体外对DPPH·、ABTS+·自由基清除率最高,分别为75.75%、98.85%;Rutin-nLip可提高小鼠抗氧化能力,降低机体氧化应激水平,减轻感染PRV小鼠的脏器组织病理损伤。结果表明,改良薄膜分散法制备的Rutin-nLip包封率高,且具有良好的体内外抗氧化活性,对PRV感染诱导的氧化应激损伤具有干预作用。