干扰角蛋白17基因对燕山绒山羊黑色素细胞黑色素生成相关基因的影响OA
旨在通过建立燕山绒山羊皮肤黑色素细胞的原代培养,探究角蛋白17(KRT17)在该细胞中的表达及其对黑色素生成关键基因表达的调控作用。采用二次酶解法(DispaseⅡ+胰蛋白酶)和细胞筛分离培养燕山绒山羊耳缘皮肤黑色素细胞,通过多巴染色、Masson-Fontana黑色素染色和前黑素体蛋白(gp100)免疫组化进行鉴定;KRT17基因的干扰片段转染至黑色素细胞后,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot验证干扰效率,检测小眼畸形相关转录因子(MITF)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)和多巴色素异构酶(DCT)的mRNA相对表达水平和黑色素含量。结果:成功获得了形态典型,多巴染色阳性,Masson-Fontana黑色素染色阳性且gp100表达阳性(纯度>90%)的原代燕山绒山羊黑色素细胞;干扰结果显示,与对照组相比,沉默KRT17组黑色素含量显著升高(P<0.05),显著上调了MITF、TYR、TYRP1和DCT的mRNA表达水平(P<0.05)。本研究成功建立了燕山绒山羊黑色素细胞的体外培养体系,证实KRT17在该细胞中稳定表达,且通过负向调控MITF及其下游靶基因的转录水平,参与调控燕山绒山羊黑色素的生成过程。
马世杰;张泽华;李宏强;孙晓凤;谢遇春;刘铮铸;李简溪;刘蕊;张兴臣;张家璇;乔贤
河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004河北科技师范学院动物科技学院/河北省特色动物种质资源挖掘与创新重点实验室,河北秦皇岛066004
农业科技
燕山绒山羊黑色素细胞角蛋白17黑色素生成
《畜牧与兽医》 2026 (8)
P.1-8,8
河北省高等学校科学研究项目青年基金项目(QN2026802)河北省自然科学基金青年科学基金项目(C2025407073)。
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