葫芦巴碱调控SPHK1/S1P/S1PR3通路对子宫内膜癌细胞增殖和致瘤性的影响OA

目的探讨葫芦巴碱(Trig)调控鞘氨醇激酶1(SPHK1)/1-磷酸鞘氨醇(S1P)/1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)通路对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和致瘤性的影响。方法Ishikawa细胞分为:空白组、不同浓度Trig(Trig-低、Trig-高)组、SPHK1组、Trig-高+空载组、Trig-高+SPHK1组,通过克隆形成、CCK-8检测细胞增殖;qRT-PCR检测SPHK1 mRNA表达水平;免疫印迹检测抗原ki67、细胞癌基因Myc(c-Myc)以及SPHK1/S1P/S1PR3通路相关蛋白表达;建立裸鼠移植瘤实验,分离瘤体并称重,免疫印迹检测移植瘤组织中ki67、c-Myc以及SPHK1/S1P/S1PR3通路相关蛋白表达;HE、免疫组化分别检测移植瘤组织病理变化及ki67、c-Myc表达。结果与空白组相比,Trig-低组、Trig-高组克隆数、OD、ki67、c-Myc、SPHK1 mRNA及蛋白、S1P、S1PR3表达降低,SPHK1组克隆数、OD、ki67、c-Myc、SPHK1 mRNA及蛋白、S1P、S1PR3表达增加(P<0.05);与Trig-高+空载组相比,Trig-高+SPHK1组克隆数、OD、ki67、c-Myc、SPHK1 mRNA及蛋白、S1P、S1PR3表达增加(P<0.05);与SPHK1组相比,Trig-高+SPHK1组克隆数、OD、ki67、c-Myc、SPHK1 mRNA及蛋白、S1P、S1PR3表达降低(P<0.05)。体内实验显示,不同剂量Trig可降低移植瘤瘤重增加,抑制增殖相关蛋白以及SPHK1/S1P/S1PR3通路相关蛋白表达(P<0.05)。结论Trig抑制EC细胞增殖,抑制肿瘤生长,其机制与抑制SPHK1/S1P/S1PR3通路有关。