陆地棉GhTIFY5A基因克隆及棉铃虫取食胁迫下表达分析OA

陆地棉(Gossypium hirsutum L.)作为重要的天然纤维作物,常受棉铃虫(Helicoverpa armigera)危害.为探究GhTIFY5A在棉花抗虫响应中的潜在调控作用,为后续功能验证及抗虫基因筛选提供理论依据,以陆地棉18BZ6为材料,利用生物信息学分析其理化性质及结构,克隆该基因并通过qRT-PCR分析陆地棉在虫食胁迫过程中GhTIFY5A的表达量差异变化.结果表明,成功克隆的GhTIFY5A基因的CDS为360 bp,编码蛋白含119个氨基酸(分子量13.7 ku,等电点9.60),具有保守的TIFY和Jas结构域,分别在100～192氨基酸位点和292～354氨基酸位点,属于亲水性不稳定蛋白,无信号肽及跨膜结构,二级结构以无规则卷曲(67.23％)和α-螺旋(21.85％)为主,主要定位于细胞核,三级结构同源建模显示高可信度(GMQE=0.70),预测含有11个丝氨酸和5个苏氨酸磷酸化位点.系统进化分析显示,GhTIFY5A与野西瓜苗、大麻槿和木槿的TIFY5A蛋白亲缘关系最近.虫食胁迫下表达动态发现GhTIFY5A表达极显著上升,3 d达到峰值,相较于3 d,5 d表达显著降低,7 d仍然维持在高于基础水平状态,说明棉铃虫取食对于GhTIFY5A基因的表达有一定的影响.