GPX3抑制ROS介导的NET形成减轻肾移植缺血-再灌注损伤OA

目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)在肾移植缺血-再灌注损伤中的作用和潜在机制。方法将C57BL/6小鼠按照干预条件分为4组,分别为假手术组(Sham组)、肾移植组(KT组)、肾移植+GPX3过表达组(KT+GPX3组)和肾移植+GPX3过表达+活性氧簇(ROS)激动剂组(KT+GPX3+CADD522组)。模型建立24 h后,取下腔静脉血检测血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Scr)。取左侧肾脏组织,免疫荧光染色检测ROS和NADPH氧化酶2(NOX2),酶联免疫吸附试验检测粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β,蛋白质印迹法检测髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)。结果与Sham组比较,KT组GPX3表达水平降低;与KT组相比,KT+GPX3组GPX3表达水平升高;与KT+GPX3组比较,KT+GPX3+CADD522组GPX3表达水平降低(均为P<0.05)。与Sham组比较,KT组Scr、BUN、NGAL和KIM-1表达水平升高;与KT组比较,KT+GPX3组Scr、BUN、NGAL和KIM-1表达水平下降;与KT+GPX3组比较,KT+GPX3+CADD522组Scr、BUN、NGAL和KIM-1表达水平升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,KT组NOX2和ROS表达水平升高;与KT组相比,KT+GPX3组NOX2和ROS表达水平降低;与KT+GPX3组比较,KT+GPX3+CADD522组NOX2和ROS表达水平升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,KT组MPO和CitH3表达水平升高;与KT组比较,KT+GPX3组MPO和CitH3表达水平降低;与KT+GPX3组比较,KT+GPX3+CADD522组MPO和CitH3表达水平升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,KT组TNF-ɑ和IL-1β表达水平升高;与KT组比较,KT+GPX3组TNF-ɑ和IL-1β表达水平降低;与KT+GPX3组比较,KT+GPX3+CADD522组TNF-ɑ和IL-1β表达水平升高(均为P<0.05)。结论GPX3可能通过抑制ROS介导的中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成,减轻肾脏组织中的炎症反应,进而缓解肾移植IRI。