长链非编码RNA FAL1介导氧化苦参碱对食管鳞状细胞癌ECA-109细胞增殖的抑制效应及作用机制OA

目的探讨氧化苦参碱对食管鳞状细胞癌(ESCC)ECA-109细胞增殖、凋亡的调控效应,并明确长链非编码RNA(lncRNA)FAL1在其中的介导作用及分子机制。方法以ECA-109细胞为研究对象,设置不同处理组:①剂量效应组:对照组(常规培养)及3、6、12μmol/L氧化苦参碱处理组;②功能验证组:在12μmol/L氧化苦参碱处理基础上,分别转染阴性对照siRNA(si-NC)、FAL1靶向siRNA(si-FAL1)、空载质粒(Vector)或FAL1过表达质粒。采用EdU染色法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AKT、Bcl-2、cleaved caspase-3蛋白表达水平,RNA荧光原位杂交(FISH)实验检测lncRNA FAL1的表达及定位。结果与对照组相比,12μmol/L氧化苦参碱处理组细胞增殖率显著降低[(16.70±1.71)%vs(35.60±2.96)%,P<0.05],凋亡率显著升高[(28.00±1.08)%vs(3.50±0.15)%,P<0.05];同时AKT、Bcl-2蛋白表达水平下调,cleaved caspase-3蛋白表达水平上调,lncRNA FAL1表达水平显著降低(P均<0.05)。功能验证实验显示,与氧化苦参碱+si-NC组相比,氧化苦参碱+si-FAL 1组细胞增殖率进一步降低至(11.50±1.21)%,凋亡率回升至(32.60±2.01)%,AKT、Bcl-2蛋白表达水平进一步下调,cleaved caspase-3蛋白表达水平上调(P均<0.05);与氧化苦参碱+Vector组相比,氧化苦参碱+FAL1组细胞增殖率回升至(20.30±1.76)%,凋亡率回落至(20.80±1.68)%,上述蛋白表达趋势被逆转(P均<0.05)。结论氧化苦参碱可通过下调lncRNA FAL1表达,抑制AKT信号通路活化,进而诱导ESCC细胞凋亡、抑制细胞增殖,lncRNA FAL1可能是氧化苦参碱抗ESCC作用的潜在分子靶点。