高效液相色谱法快速鉴定植物病原菌培养液中的11种致病毒素OA

建立了快速鉴定植物病原菌培养液中11种致病毒素(2,5-呋喃二甲醇、5-羟甲基糠醛、展青霉素、对羟基苯甲醛、对羟基苯乙醇、对羟基苯乙酸、对羟基苯甲酸、间苯二酚、对甲氧基苯酚、蜂蜜曲菌素和赭曲霉素A)的高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)分析方法。采用Richard液体培养基对病原菌进行发酵培养,培养样品经超声辅助萃取、Na_(2)SO_(4)盐析分层及C_(18)吸附净化后,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱以分离11种毒素物质,通过保留时间与紫外光谱双重匹配进行定性鉴定,外标法进行定量分析。结果表明,11种毒素在60 min内实现分离,定量限范围0.10~0.25 mg/L,加标回收率为81%~99%。将方法应用于苹果炭疽叶枯菌、苹果轮纹病菌和苹果褐腐病菌发酵液中毒素的靶向鉴定,并经质谱定性验证,结果显示3种病原菌培养液中分别含有1.55 mg/L 2,5-呋喃二甲醇、3.28 mg/L蜂蜜曲菌素和1.87 mg/L对甲氧基苯酚。研究为病原菌发酵液中11种毒素的快速筛查提供了一种准确、可靠的方法。