系列牛血清白蛋白溶液标准物质的研制OA

牛血清白蛋白不仅常用作考马斯亮蓝法、双缩脲法、福林酚法等蛋白质定量方法的标准,还普遍用于微量核酸蛋白分析仪等多种蛋白质分析仪器的计量校准。因此,研制不同浓度的系列牛血清白蛋白溶液标准物质,是保证仪器校准工作顺利开展、确保蛋白质定量结果准确可比的关键需求。通过比较冻存管、低吸附冻存管、Eppendorf管及硅烷化安瓿瓶保存的BSA溶液与新鲜配制BSA溶液的峰面积,筛选无吸附的包装容器。以GBW09815牛血清白蛋白成分量标准物质为原料,采用重量-容量法精密配制,以配制值作为定值结果,并由美国NIST SRM 927f BSA溶液标准物质进行量值核验。采用HPLC法或改良紫外分光光度法,对1~2μL取样量的BSA溶液进行均匀性与稳定性检验。基于硅烷化安瓿瓶在吸附实验中表现出对BSA溶液几乎无吸附的特性,因此以其为包装容器研制了0.01~10 mg/mL共10个浓度水平的BSA溶液标准物质;该标准物质均匀性良好,最小取样量为1~2μL,在4℃下保存稳定性可达16个月,已被批准为国家二级有证标准物质GBW(E)091461~091470。通过克服包装容器的吸附效应并改进紫外分光光度法提高低浓度微量样品的分析精密度,成功研制出10个浓度水平的BSA溶液标准物质,有效解决了微量核酸蛋白分析仪校准及考马斯亮蓝法等蛋白质含量测定中的量值溯源难题,同时为未来其他蛋白质溶液标准物质的开发奠定了技术基础并提供了参考。