基于网络药理学和代谢组学探讨四物汤改善卵巢功能减退的作用机制OA

通过中药系统药理学数据库(TCMSP),有机小分子生物活性数据库(PubChem),瑞士靶点预测数据库(SwissTargetPrediction)等在线平台查询四物汤中主要的化合物及其对应的作用靶点;以卵巢功能减退(DOR)相关疾病为关键词,在疗效药靶数据库(TTD),药物银行数据库(DrugBank),疾病基因关联网络(DisGeNET)和人类基因数据库(GeneCards)进行疾病靶点的搜索及筛查,取化合物和疾病的交集靶点,利用蛋白质间相互作用网络分析数据库(STRING 11.5)获取蛋白质相互作用关系,将高置信度蛋白质导入细胞网络可视化软件(Cytoscape 3.8.2),构建“中药-化合物-靶点”网络;利用Cytoscape软件中ClueGO插件对核心靶点进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。同时,采用150 mg/kg背部皮下注射D-半乳糖,制备DOR大鼠模型,检测大鼠血液中激素相关指标促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))的表达水平以及造模前后的卵巢情况,对各给药组的血清进行非靶向代谢组学分析。结果显示,网络药理学分析四物汤共筛选出127个核心化合物,对应141个核心靶点;动物实验结果显示,与正常组相比,其他各组的E 2质量浓度都降低;与模型组相比,四物汤高剂量组能显著降低LH水平,升高E_(2)质量浓度,降低FSH水平,但无显著性差异;四物汤低剂量组能显著增加E 2质量浓度,降低FSH水平;大鼠卵巢组织卵泡大多闭锁,四物汤低剂量组、四物汤高剂量组的闭锁卵泡减少,初级卵泡及次级卵泡数增加;造模前后以及四物汤给药前后大鼠体内的代谢物发生了明显的改变,与模型组相比,四物汤低剂量组、四物汤高剂量组的差异代谢物的水平具有一定的逆转作用;通过MetaboAnalyst 5.0软件对差异代谢物进行通路分析,共涉及到的代谢途径包括磷酸戊糖途径,色氨酸代谢,柠檬酸循环,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,酪氨酸代谢,赖氨酸降解,精氨酸和脯氨酸代谢,谷胱甘肽代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢。四物汤对DOR模型大鼠的卵巢功能具有改善作用,其作用机制可能与调节能量代谢与生物合成、缓解氧化应激损伤有关。